实验发现,鲟鱼肽可促进Raw264.7细胞的增殖,在250µg/ml增殖活性最大为143.97±8.6%。鲟鱼肽能够促进Raw264.7分泌NO,具有一定的免疫调节作用。
2-)含量。
实验结果
4.1 MTT实验测定鲟鱼多肽对细胞存活率的影响
巨噬细胞是单核巨噬细胞系统中的主要成分,具有吞噬外来入侵的病原微生物、处理和呈递抗原多种作用,通过吞噬和分泌细胞因子从而杀死外来病原体,对维持人体健康起到了关键作用。LPS(脂多糖)是一种可以激活巨噬细胞的物质,因此本实验选择其作为阳性对照。MTT实验可以用于评价药物对细胞的毒性影响,细胞活力大小与细胞毒性呈负相关,一般认为细胞活力<90%即具有一定的细胞毒性,细胞活力>90%即不具有细胞毒性。图4-1是不同浓度的鲟鱼多肽对Raw264.7细胞的毒性作用,当鲟鱼多肽在12.5-500µg/ml浓度范围内时对该细胞没有毒性作用,并在一定程度上可促进巨噬细胞的增殖,当鲟鱼多肽在12-250µg/ml浓度范围内时,增殖活性随鲟鱼多肽的浓度增加而增加,并且均高于阳性对照组的增殖活性(118.76±5.78%),其最大增殖活性为143.97±8.6%。
图4-1 鲟鱼多肽对 RAW264.7 细胞活力的影响
4.2 鲟鱼多肽对细胞分泌NO的影响
NO也是免疫反应中重要的细胞因子,可由被激活的巨噬细胞分泌,是一种反应性氮中间产物,属于具有氧化性能的自由基。少量的NO便具有极强的杀伤力,能够病原体和肿瘤细胞等。但是NO若分泌过量,也能损坏正常的宿主细胞,从而引起全身性的炎症反应。因此,当机体无炎症时,少量的NO即可提高机体的免疫功能。根据前面MTT实验的结果选择12.5-500µg/ml进行下一步实验。从图4-3是不同浓度的鲟鱼多肽对Raw264.7细胞分泌NO的影响,各个浓度的鲟鱼多肽均能促进Raw264.7细胞分泌NO,在浓度为100µg/ml时其促进作用最大,为12.04±0.17µM。
图4-2 鲟鱼多肽对 RAW264.7 细胞分泌NO的影响
实验小结